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缔因安复杂样本提取解决方案之二:粪便提取
2023-07-21




幽门螺杆菌

感染及危害


幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,简称Hp),是一种螺旋形、微厌氧的革兰氏阴性菌,该菌的生长繁殖对营养要求较高,而且可以抵抗胃酸,进入人体后可以在胃黏膜上皮细胞中生存并繁殖,在这个过程中会产生大量的侵袭因子和毒素,与慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌发生有密切的联系。2017年10月27日世界卫生组织首次将幽门螺杆菌收录在一类致癌物清单中。


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(图片来源于网络,如有侵权请联系删除)


幽门螺杆菌感染主要与胃炎、消化性溃疡及胃癌等疾病有关:

  • 胃炎:幽门螺杆菌在胃内定植后会产生大量的毒力因子,这些毒力因子会使胃黏膜上皮细胞发生变性,破坏正常的胃黏膜屏障,导致胃酸侵蚀胃黏膜,从而引发胃炎。

  • 消化性溃疡:幽门螺杆菌在破坏胃黏膜屏障的同时,还可能刺激胃酸的分泌,加重胃黏膜和十二指肠黏膜的损伤,进而导致胃溃疡或十二指肠溃疡的发生。约10%的幽门螺杆菌患者会发展为溃疡。

  • 胃癌:幽门螺杆菌可以打破胃黏膜上皮细胞的繁殖和死亡的平衡,导致慢性萎缩性胃炎。随着疾病进一步进展,可以发展为肠上皮化生、不典型增生甚至癌变。


幽门螺杆菌具有传染性,感染幽门螺杆菌的患者是主要的传染源,目前研究人员发现幽门螺杆菌可以通过唾液、呕吐物、粪便等途径在人与人之间传播。在我国居民幽门螺杆菌总体感染率近50%,同时《第六次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告》中明确指出筛查并根除幽门螺杆菌以预防胃癌具有重要经济效益和社会价值。



常规 Hp

检测方法



目前Hp检测方法主要包括非侵入性和侵入性两大类,区别在于侵入性方法需要胃镜检查协助。快速尿素酶试验(RUT)是侵入性经典方法,非侵入性方法主要包括:尿素呼气试验(UBT)、粪便Hp抗原检测(SAT)、Hp血清学检测。


1

快速尿素酶试验(RUT)

通过胃镜检查取出胃粘膜组织样本后放入培养基中进行快速尿素酶试验,如果培养基由黄变红则为阳性,即可确诊。该检查具有精准、快速等优点,缺点是操作复杂、有创。

2

尿素呼气试验(UBT)

原理是Hp产生的尿素酶可将尿素分解为氨气和二氧化碳,二氧化碳在胃肠道吸收后进入血液循环,经肺呼出。当被检测者口服13C或14C核素标记的尿素后,通过检测呼出气体中的核素标记二氧化碳,即可判断是否存在Hp感染。该检查具有无创、精准、便捷、经济等优点,但其结果容易受抗生素、铋剂和抗酸药物的影响。

3

粪便Hp抗原检测(SAT)

原理是定植于胃黏膜上皮细胞表面的幽门螺杆菌代谢产物和死亡菌体崩解产物随上皮细胞更新脱落,这些抗原成分可抵御消化酶的降解出现在粪便中,通过检测粪便样本中的抗原成分从而判断是否感染。SAT的准确性也受PPI、抗生素等抑菌药物以及粪便的采样、储存和运输的影响

4

Hp血清学检测

通过抽血,检测血清中幽门螺杆菌的抗体水平。人体受到幽门螺杆菌感染后,产生相应的抗幽门螺杆菌的抗体,使检测结果呈现阳性。由于抗体效价在根治成功后仍能维持很长时间,故无法区分现症感染和既往感染。




缔因安Hp

便检测方案



目前分子检测技术中Hp核酸检测需要从胃里面取出胃粘膜样本,过程比较复杂且有创,而利用粪便进行Hp核酸检测具有无创、便捷及患者易接受的优点,并有望用于指导Hp阳性患者进行精准个体化根除治疗。而粪便作为复杂样本,杂质以及提取后核酸抑制物含量较高,传统方法提取的核酸产量和纯度难以满足检测需求。


缔因安SMART核酸提取仪基于自身超声提取的技术优势,能高效利用粪便样本实现Hp核酸提取从而进行下游检测,常规2mL粪便保存液上样,预处理简单,提取时长仅需27min,所得DNA相较其他粪便提取方法浓度更高,与胃粘膜样本的一致性也更好


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以上是采用缔因安SMART核酸提取仪处理临床粪便样本,并对样本进行Hp检测的结果。对比方法为某上市产品的胃粘膜样本检测Hp,实验入组46例幽门螺杆菌疑似病例,两种方法的阳性符合率为93.1%,阴性符合率为100%,总符合率为95.65%,一致性较好。



参考文献:

[1] 第六次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告(非根除治疗部分),中华医学会,2022年5月.







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