缔因安复杂样本提取解决方案之一：痰液提取

2023-06-15

痰液提取的背景

结核病俗称“痨病”，是由结核分枝杆菌侵入人体后引起的一种具有强烈传染性的慢性消耗性疾病。作为全球最为严重的公共卫生问题之一，结核病在发展中国家具有较高的感染率。根据世界卫生组织发布的《2022年全球结核病报告》显示，2021年全球新发结核病患者1060万，其中我国新发结核病患者数为78万，在30个结核病高负担国家中估算结核病发病数排第三位，占全球结核病例的7.4%，仅低于印度尼西亚96.9万和印度295万。

提高实验室检测能力，实现结核病患者早发现、早治疗是有效控制结核病蔓延、维护大众安全健康的必要措施。随着基因组学和蛋白质组学的发展，相关技术也逐渐应用于结核病快速诊断，如免疫学方法、PCR、核酸杂交等。PCR则是一种快速、安全、高特异性且重复性较好的结核杆菌检测方法，可以直接用于临床标本的检测。如何更好的利用 PCR 检测技术，前提和关键在于结核分枝杆菌 DNA的提取^[1]。

痰液作为诊断结核病感染的重要生物样本，在感染发生时分泌量会迅速增加，通过对痰液的染色镜检、培养、分子标志物分子检测可以为患者诊断与治疗提供宝贵的信息。因此如何高效提取痰液中结核分枝杆菌 DNA对实现结核病快速诊断具有十分重要的意义。

痰液提取的难点

不同于其他一般病原菌DNA的提取，痰液样本和结核分枝杆菌自身都存在一定的特殊性，给获取高质量DNA模板带来了许多阻碍，主要表现在以下两个方面：

① 痰液样本粘度高、不易溶解

痰液样本具有粘度高、不易溶解的特点，若预处理不当，很容易造成假阴性的结果。

② 分枝杆菌细胞壁脂质含量高、韧性强

分枝杆菌细胞壁大部分由分枝菌酸、糖脂和其他脂肪酸构成，脂质含量高、疏水性强，同时结构坚韧，很难通过常规裂解液进行裂解。

目前多数痰液提取实验方法缺乏标准化的流程，且步骤复杂，难以克服以上痰液提取的难点，因此临床实验室鉴定中需要更为快速、便捷和规范的痰液提取方案^[2]。

解决方案

苏州缔因安生物科技有限公司推出的SMART系列核酸提取仪以及配套提取试剂，通过创新的超声法+磁珠法可实现对结核分枝杆菌细胞壁充分裂解，核酸释放更加完全。常规400uL上样提取，也可满足大体积上样需求，提取时长不超过30min。不仅实现对样本高效处理，同时具有核酸产量高、方便下游扩增的优势（扩增效果如下图所示）。

痰液中结核分枝杆菌提取检测

您还在为痰液复杂样本核酸提取问题而烦恼吗？缔因安SMART核酸提取仪帮您解决！欢迎各位来电咨询！

【参考文献】

1. 文岚，张兵，郭彦昌，等。5种前处理方法对痰中结核分枝杆菌 DNA 提取的影响［J］．实用预防医学，2013，20( 9) : 1056—1059.

2. 苏明权，苏哲，岳乔红，等．提取结核分枝杆菌DNA 3种方法的比较［J］．临床检验杂志，2005，23( 3) : 215.

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